Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start Green представляет собой модифицированную
Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.
Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq Green, содержащим MgCl₂, а также утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР). Маркерные красители инертны, не взаимодействуют с компонентами ПЦР-смеси и не препятствуют использованию ПЦР-продуктов в реакциях рестрикции или лигирования, а также секвенированию. Если предполагается анализ ПЦР-продуктов с помощью спектрофотометрии или флуориметрии, рекомендуется использовать для амплификации бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.
Также предлагается формат в виде 2-кратной готовой смеси для ПЦР – мастер-микс DreamTaq Hot Start Green.
ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.
ДНК-полимераза DreamTaq способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.
Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.
Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:
- более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
- повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
- способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
- требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg²+благодаря улучшенному реакционному буферу;
- возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель без добавления дополнительных реагентов для электрофореза.
Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:
- рутинная ПЦР;
- синтез фрагментов для ТА-клонирования;
- скрининг рекомбинантных клонов;
- обратная транскрипция с последующей ПЦР;
- генотипирование.
В набор входят:
- 200 единиц:
vДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.
- 500 единиц:
vДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.
- 2500 единиц:
vДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.
- 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 10 × 1,25 мл.
Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.