Проточный цитофлуориметр, до 4 лазеров, до 16 флуоресцентных параметров, с УЗ-фокусировкой и визуализацией, Attune CytPix, Thermo FS

Проточный цитометр Attune CytPix для широкого спектра задач – компактный, простой, удобный в использовании.

С помощью изображений полученных Attune CytPix можно оценит морфологию клеток, отслеживать контаминацию, показать межклеточные взаимодействия, морфологические характеристики апоптотических клеток и убедиться, что через луч лазера проходит отдельная клетка, а не конгломераты, их обломки или мусор, а так же можно просматривать и группировать изображения.

Уникальные особенности проточного цитометра Attune CytPix

• Возможность протокола анализа без лизиса и отмывок для минимизации потери клеток, и экономии время, а также упрощение подготовки;
• снижение времени пробоподготовки на 65%;
• характеристика клеточных популяций;
• стабильное качество изображения при высокой скорости потока;
• описание морфологии апоптотических клеток;
• исследование межклеточных взаимодействий;
• контроль качества клеточных культур, отслеживание контаминации;
• просмотр и группировка изображений, а также определение типов клеток;
• визуализация для подтверждения и настройки гейта, включая только отдельные клетки, представляющие интерес;
• система очистки, которая механически уменьшает возникновение засорения.

Протоколы подготовки образцов.

Примеры использования проточного цитометр Attune CytPix

Рисунок 1. Ядра эритроцитов курицы (CEN) склонны слипаться в дублеты или другие агрегаты. Стратегия гейтирования слипшихся ядер эритроцитов курицы с Attune CytPix.

Рисунок 2. С помощью проточного цитометра Attune CytPix можно просматривать и группировать изображения, а также определять типы клеток E. coli на основе их морфологических характеристик. В течении роста клетки E. coli, развиваются в два типа колониеобразующих клеток - короткие, которые напоминают отдельные клетки, и удлиненные структуры.

Рисунок 3. Отслеживание контаминации критически важно для анализа клеточных линий. На пример, перед трансплантацией клеток Вы можете их проверить на контаминацию с помощью Attune CytPix.

Рисунок 4. Визуализация Attune CytPix показывает межклеточные взаимодействия на примере CAR T-клеток, нацеленных на клетки лимфомы.

Рисунок 5. Анализ апоптоза клеток (с использованием аннексина V и PI) дополняется изображениями с выявленным морфологическим особенностями каждой клетки. Морфологические характеристики апоптотических клеточных популяции, полученные проточным цитометром Attune CytPix.

Особые преимущества проточного цитометра с визуализацией Attune CytPix

• Программное обеспечение и камера проточного цитометра Attune CytPix гарантируют, что события, которые анализируются, являются отдельными клетками, а не дублетами, скоплениями, обломками клеток или мусором.
• Акустическая фокусировка в 10 раз быстрее любой другой в проточном цитометре Attune CytPix.

Гидродинамическая фокусировка обеспечивает точное позиционирование клеток по центральной оси, позволяя клеткам быть сосредоточенными на точку лазерного луча и совместно с высокоскоростной камерой обеспечивает качественную картинку (Рисунок 6).

Проточный цитометр Attune CytPix с высокоскоростной камерой имеет большое значение для исследования в области клеточной биологии, генной терапии и оптимизации их протоколов.

Рисунок 6. Акустическая фокусировка в сравнении с традиционной гидродинамической фокусировкой.

Рисунок 7. Стабильное качество изображения при высокой скорости потока 12,5 мик/мин, 25 мик/мин, 100 мик/мин, 200 мик/мин, 500 мик/мин и 1000 мик/мин. Нет изменений в частоте визуализации и получению картин. Простая настройка фокуса и камеры для получения качественного изображения.

Технические характеристики проточного цитометра Attune CytPix

• Количество лазеров – 2/4;
• каналы детекции – канал прямого и бокового светорассеяния и 14 флуоресцентных каналов;
• освещение изображения – 405 нм лазер с менее 50 наносекундный импульс;
• акустическая фокусировка;
• чувствительность – ≤80 MESF for FITC, ≤30 MESF for PE, ≤70 MESF for APC;
• скорость анализа, событий/сек – более 35 тыс.;
• скорость фотографии, фото/сек – 6000;
• кратность увеличения – 20×;
• разрешение камеры, нм/Мп – 0,3;
• размер частиц, нм – до 800;
• статус использования – только для исследований;
• программное обеспечение – Invitrogen Attune 21 CFR Part 11;
• процессор – Nvidia Quadro P2200 GPU;
• жесткий диск – 2 x 8TB SSD, 2,5-inch Samsung 870 QVO, 560 MB/s;
• габариты, В × Ш × Г, см – 49 × 58 × 43.

Опции: автоподатчик Invitrogen CytKick Autosampler и робот подачи планшетов Orbitor RS2 Microplate Mover увеличат операционную мощность, уменьшат количество ошибок, связанных с человеческим фактором.

Рисунок 8. Дополнительные конфигурации увеличивают операционную мощность, уменьшают количество ошибок, связанных с человеческим фактором.
(A) Attune CytPix Flow Cytometer
(B) Invitrogen CytKick Autosampler
(C) Orbitor RS2 Microplate Mover

Таблица 1. Сравнение автосэмплеров Invitrogen CytKick и CytKick Max

Характеристика	Автосэмплер CytKick	Автосэмплер CytKick Max
Пропускная способность	42 мин для 96-луночного планшета в высокопропускном режиме	22 мин для 96-луночного планшета (в ускоренном режиме с одной промывкой, одного смешивания и полного анализа образца 20 мкл)
Совместимость	96-луночные глубоколуночные планшеты 96-луночные стандартные планшеты 384-луночные глубоколуночные планшеты 384-луночные стандартные планшеты	96-луночные глубоколуночные планшеты 96-луночные стандартные планшеты 384-луночные глубоколуночные планшеты 384-луночные стандартные планшеты 1,5 и 2 мл микроцентрифужные пробирки в шативе (до 24 мест) 96-луночные планшеты, запечатанные фольгой 384-луночные планшеты, запечатанные фольгой, дополнительные типы планшет

Таблица 2. Конфигурации цитометра Attune CytPix.

Лазеры	Конфигурация лазеров	Число каналов детекции для выбранных лазеров				Всего каналов детекции*	Каталожный номер
		Фиолетовый, 405 нм	Синий, 488 нм	Желтый, 561 нм	Красный, 637 нм
2	Синий / желтый	†	3	4	†	9	A51842
	Синий / красный	†	4	†	3	9	A51840
	Синий / фиолетовый	4	4	†	†	10	A51841
	Синий / фиолетовый 6	6	4	†	†	11	A51843
3	Синий / красный / желтый	†	3	4	3	12	A51845
	Синий / фиолетовый /желтый	4	3	4	†	13	A51846
	Синий / красный / фиолетовый	4	4	†	3	13	A51844
	Синий / красный / фиолетовый 6	6	3	†	3	14	A51847
4	Синий / красный / желтый / фиолетовый	4	3	4	3	16	A51848
	Синий / красный / желтый / фиолетовый 6	6	2	3	3	16	A51849

* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.

† - Доступна модификация лазеров, зеленый лазер не доступен в Attune CytPix.

Таблица 3. Конфигурация лазеров, количество каналов детекции в сравнении Attune CytPix с Attune NxT

Лазеры	Конфигурация лазеров	Фиолетовый, 405 нм	Синий, 488 нм	Желтый, 561 нм	Зеленый, 532 нм	Красный, 637 нм	Всего каналов детекции*	Attune CytPix	Attune NxT
1	Синий	**	4	**	**	**	6	N/A	A24864
2	Синий / зеленый	**	3		4	**	9	N/A	A28995
	Синий / желтый	**	3	4		**	9	A51842	A24861
	Синий / красный	**	4	**	**	3	9	A51840	A24863
	Синий / фиолетовый	4	4	**	**	**	10	A51841	A24862
	Синий / фиолетовый 6	6	3	**		**	11	A51843	A29002
3	Синий / зеленый / красный	**	3		4	3	12	N/A	A28997
	Синий / красный / желтый	**	3	4		3	12	A51845	A28993
	Синий / зеленый / фиолетовый	4	3		4	**	13	N/A	A28999
	Синий / фиолетовый / желтый	4	3	4		**	13	A51846	A24859
	Синий / красный / фиолетовый	4	4	**	**	3	13	A51844	A24860
	Синий / красный / фиолетовый 6	6	3	**		3	14	A51848	A29003
4	Синий / красный / фиолетовый / зеленый	4	3		4	3	16	N/A	A29001
	Синий / красный / желтый / фиолетовый	4	3	4		3	16	A51848	A24858
	Синий / красный / желтый / фиолетовый 6	6	2	3		3	16	A51849	A29004

* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.

** - Доступна модификация лазеров, зеленый лазер не доступен в Attune CytPix.

Выбрать можно конфигурацию прибора, соответствующую вашим потребности. Проточный цитометр Attune CytPix доступен в конфигурациях с 2–4 лазерами с визуализацией в светлом поле, а проточный цитометр Attun NxT доступен с 1–4 лазерами без визуализации.

Таблица 4. Выбор красителей для определения жизнеспособности клеток

Лазер	Нефиксирующие красители	Фиксирующие красители
УФ	DAPI (470)	LIVE / DEAD Fixable Blue (450)
405 нм	SYTOX Blue (480)	LIVE / DEAD Fixable Violet (451)
		LIVE / DEAD Fixable Lime (506)
		LIVE / DEAD Fixable Aqua (526)
		LIVE / DEAD Fixable Yellow (575)
405 нм	SYTOX Green (523)	LIVE / DEAD Fixable Green (520)
	Propidium Iodide (617)	LIVE / DEAD Fixable Olive (557)
	SYTOX AADvanced (647)	LIVE / DEAD Fixable Red (615)
561 нм	SYTOX Orange (570)	LIVE / DEAD Fixable Orange (602)
	SYTOX AADvanced (647)
633/5 нм	SYTOX Red (660/20*)	LIVE / DEAD Fixable Far Red (665)
		LIVE / DEAD Fixable Scarlet (723)
		LIVE / DEAD Fixable Near IR (775)
		LIVE / DEAD Fixable Near IR (780)
808 нм		LIVE / DEAD Fixable Near IR (876)